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常见流式样本的保存方法及注意事项

流式细胞术在细胞计数、抗原检测、细胞功能分析以及核酸检测等领域中具有广泛应用。相比其他检测方法，流式细胞术具有目标精准、指标量化、样本节约、高通量等优势。流式样本的制备和保存对实验结果的影响至关重要。以下为流式细胞术常见样本的保存方法及注意事项。

流式细胞术常见样本分类

样本类型	常见特征
流体样本	包括骨髓、外周血、体液（如胸水、腹水、脑脊液），细胞通常为单细胞状态，需要使用抗凝剂并裂解红细胞。
体外培养细胞	包括贴壁细胞和悬浮细胞。
实体样本	免疫系统组织（如胸腺、脾脏、淋巴结）以及非免疫系统组织（如肝脏、心脏、肺脏、胃肠组织等）。这些样本通常需要通过酶消化或研磨以制备单细胞悬液。

流体样本的处理与保存方法

1. 外周血样本

处理方法：采集新鲜样本并与抗凝剂充分混匀，注明样本采集的日期和时间。
保存方法：使用不同抗凝剂的保存时长有所不同。乙二胺四乙酸二钾（EDTA）可稳定保存12-24小时，枸橼酸葡萄糖液可保存72小时，肝素钠则可保存48小时。
注意事项：若需进行白细胞计数、分类或流式检测，应优先使用EDTA作为抗凝剂。
应用：血液疾病的免疫分型检测、白细胞计数、形态学染色和分类。

2. 骨髓样本

3. 胸水、腹水、脑脊液样本

体外培养的细胞系处理与保存

实体样本的处理与保存方法

样本类型	处理方法	保存方法与时长	应用
肝脏、心脏、脾脏等软组织	筛网研磨法或酶消化法	活体组织可在4℃保存24-48小时，单细胞悬液可在4℃保存24小时，固定细胞可用4%的多聚甲醛溶液固定，1%甲醛缓冲液重悬后保存一周。	细胞分选、免疫细胞表型分析。
淋巴结、软骨、实体肿瘤等硬组织	酶消化法	固定细胞保存方法同上。	免疫细胞功能检测、分泌功能分析。